少妇无码精品12P_99久久精品国产免费看_色.www_国产黄a三级三级三级看三级黑人_亚洲AⅤ无码一区二区波多野_久久123

上海莼試生物技術(shù)有限公司
初級會員 | 第9年

13585831301

ATCC細(xì)胞
檢測試劑盒
elisa檢測試劑盒
分子生物學(xué)
培養(yǎng)基
生化試劑
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒
質(zhì)粒
PCR試劑盒
細(xì)胞培養(yǎng)
生化檢測試劑盒
PCR檢測試劑盒
標(biāo)準(zhǔn)品

加州立克次體PCR試劑盒分析說明

時間:2020/3/19閱讀:523
分享:

加州立克次體PCR試劑盒組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測稀釋液B:1×10ml。

反應(yīng)五要素:

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:

①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是Z末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復(fù)您~
在線留言
主站蜘蛛池模板: 在线视频1区 | 亚洲男人的天堂在线aⅴ视频 | 日本一二区在线观看 | 国产亚洲一区二区三区四区 | 欧美精品中文字幕久久二区 | 最近日本MV字幕免费观看 | 久久精品人人爽人人爽 | 欧美肥老太交性506070 | 国内精品国产成人国产三级李采潭 | AV中文无码乱人伦在线观看 | eeuss影院www免费播放 | 92国产精品午夜福利 | 午夜无码片在线观看影视 | 性生大片免费观看网站蜜芽 | 男女啪啪做爰高潮全过有网站 | 久久久亚洲精品一区二区三区 | 日韩天堂在线观看 | 中文字幕第15页 | 国产一区二区高清在线观看 | 亚洲欧美成人中文字幕在线 | 黑人把女人弄到高潮a片 | 788好吊妞视频gaocom | eeuss影院www免费播放 | 久热精品在线播放 | 色噜国产高清视频 | 国产欧美一区二区三区视频 | 午夜高清国产拍精品 | 伊人青青久久 | 日韩一卡2卡3卡4卡2021免费观看国色天香 | 国产精品蜜臀av免费观看四虎 | 日韩黄色在线播放 | xxxx黄色片| 日韩欧美一区二区三区四区 | 日韩视频一区二区三区在线观看 | 亚洲无码一区二区三区 | 国产欧美色一区二区三区 | 99妻人人做人人爽 | aⅴ黄色 | 16p亚洲| 18禁毛片无遮挡嫩草视频 | 国产精品一区二区三区99 |