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豚鼠前列腺素D2(PGD2) ELISA試劑盒測定步驟

時(shí)間:2020/9/10閱讀:149
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豚鼠前列腺素D2(PGD2) ELISA試劑盒測定步驟

1.加樣

  1. 除包被外都需45度加樣

  2.加樣體積要準(zhǔn)確

  3.管底加樣,不能加在管壁上

  4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡

2.溫浴  

  1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。

  2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。

  3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。

  4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺上,以便 不時(shí)觀察,待對照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。

3.洗滌  

  1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。

  2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

4.讀板  

  1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。

  2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。

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