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人抗皮膚抗體(ASA)酶聯免疫分析試劑盒操作步驟

時間:2022/11/22閱讀:408
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人抗皮膚抗體(ASA)酶聯免疫分析試劑盒操作步驟:

1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘。

溶血磷脂酰基轉移酶5抗體AGPAT5 0.2ml

遺傳性失明相關蛋白AIPL1抗體AIPL1 0.1ml

免疫調節蛋白AIRE抗體AIRE 0.2ml

磷酸化蛋白激酶AKT1抗體phospho-AKT1 (Ser473) 0.1ml

磷酸化蛋白激酶AKT1抗體phospho-AKT1 (Thr72) 0.1ml

磷酸化蛋白激酶AKT1抗體phospho-AKT1 (Tyr326) 0.1ml

乙醛脫氫酶2型抗體ALDH1A2 0.1ml

γ-氨基丁酸醛脫氫酶抗體ALDH9A1 0.2ml

衰老相關蛋白5抗體AGPS 0.2ml

磷酸化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質/α-晶體蛋白b鏈抗體phospho-alpha B Crystallin (Ser59) 0.1ml

釉基質蛋白抗體AMBN 0.2ml

磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體phospho-AMPK alpha 2 (Ser176) 0.1ml

磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體phospho-AMPK alpha 2 (Ser491) 0.1ml

磷酸化雄激素受體抗體phospho-Androgen Receptor (Ser515) 0.1ml

磷酸化雄激素受體抗體phospho-Androgen Receptor (Ser791) 0.1ml

磷酸化雄激素受體抗體phospho-Androgen Receptor (Ser94) 0.1ml

磷酸化雄激素受體抗體phospho-Androgen Receptor (Tyr363) 0.1ml

錨定蛋白重復結構域蛋白激酶ANKK1抗體ANKK1 0.2ml

磷酸化內收蛋白抗體phospho-alpha Adducin (Thr445) 0.1ml

膜粘連蛋白11抗體Annexin A11 0.2ml

膜粘連蛋白13抗體Annexin A13 0.2ml


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