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上海莼試生物技術(shù)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第9年

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ATCC細(xì)胞
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ATCC細(xì)胞組織塊法

時(shí)間:2018-2-5閱讀:128
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ATCC細(xì)胞種類不同選用不同的促細(xì)胞生長因子。腫瘤組織分離為腫瘤細(xì)胞原代培養(yǎng)的方法主要有組織塊法、酶消化法、鉭網(wǎng)法、脫落細(xì)胞法等。

1、組織塊法

將取得的瘤組織去除脂肪、結(jié)締組織及壞死部分,在平皿中用Hanks液洗3次,剪碎組織,切成1~2mm3小塊,接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,370C、5%CO2或加蓋并塞在普通恒溫箱中培養(yǎng)。

2、酶消化法

在剪碎組織,切成1~2mm3小塊中,加入0.25%胰蛋白酶或2000U/ml膠原酶,在370C水浴中消化30min或更長一些,去除消化液,用洗液洗3次,培養(yǎng)基洗1次后,用*培養(yǎng)基懸浮,并用吸管吹打分散制成細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)。以(5~10)x108個(gè)/L細(xì)胞濃度,在專業(yè)性原代腫瘤細(xì)胞*培養(yǎng)體系中,370C、5% CO2下分瓶(或皿)中培養(yǎng)。

3、鉭網(wǎng)法

在一張面積約為1cm2的鉭網(wǎng)上放入上述剪碎的一塊或幾塊腫瘤組織塊(1~2mm3大小),用鑷子輕壓,使其粘于網(wǎng)上,再把鉭網(wǎng)放入培養(yǎng)皿中,ATCC細(xì)胞使網(wǎng)下的組織塊與皿壁緊緊接觸, 在專業(yè)性原代腫瘤細(xì)胞*培養(yǎng)體系中,于370C、5% CO2下培養(yǎng),每隔2~3天換液一次,5天后可見細(xì)胞從網(wǎng)上移出,并能在相當(dāng)于腫瘤組織部位形成純凈的單層腫瘤細(xì)胞。
含量測定    苯甲酸雌二醇    100006-200504    對(duì)照品        100mg
含量測定    丙酸睪酮    100008-199404    對(duì)照品        50mg
含量測定    醋酸氟輕松    100010-200507    對(duì)照品        50mg
鑒別    醋酸氯地孕酮    100011-198501    對(duì)照品        50mg
含量測定    醋酸潑尼松    100012-200105    對(duì)照品        100mg
含量測定    地塞米松磷酸鈉    100016-20011A    對(duì)照品        100mg
含量測定    氨苯甲酸    100017-200308    對(duì)照品        50mg
檢查    對(duì)乙酰氨基酚    100018-200408    對(duì)照品        1000mg
ATCC細(xì)胞

 

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