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上海莼試生物技術(shù)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第9年

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瘧原蟲PCR 熔解曲線法檢測(cè)試劑盒

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2021-07-21 18:35:23瀏覽次數(shù):136次

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瘧原蟲PCR 熔解曲線法檢測(cè)試劑盒運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照時(shí),由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。最好在專門的區(qū)域操作。

參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:瘧原蟲PCR 熔解曲線法檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品分類:PCR 熔解曲線法
貨號(hào):CP99717
產(chǎn)品規(guī)格:間日瘧原蟲(PV)、惡性瘧原蟲(PF)、三日瘧原蟲(PM)、諾氏瘧原蟲(PK)、卵形瘧原蟲(PO)
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):
高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

儲(chǔ)存條件:
14
或-20樣品收集、處理及保存方法
1.
血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2.
血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3.
細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4.
組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5.
保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix 
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
 2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl      
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s →58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 保溫7min
注意事項(xiàng):
加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物AB液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器
實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
1070790-89-4  CYC065  5mg  Human Parainfluenza Virus 1(HPIV-1)人副流感病毒1RT-LAMP試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒  50  低溫  負(fù)20

107090-96-0  Crustacean Cardioactive Peptide  1mg  Human Polyomavirus 9 HPyV9)人多瘤病毒9 LAMP試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒  50  低溫  負(fù)20

107090-96-0  Crustacean Cardioactive Peptide  5mg  Human Polyomavirus 7HPyV7 人多瘤病毒7 LAMP試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒  50  低溫  負(fù)20

107091-89-4  Thiazole Orange  10mM*1mLinDMSO  Human Polyomavirus 6 HPyV6)人多瘤病毒6 LAMP試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒  50  低溫  負(fù)20

107091-89-4  Thiazole Orange  1g  Human Polyomavirus 6 HPyV6)人多瘤病毒6 LAMP試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(cè)(科研用)/定做種屬檢測(cè)試劑盒  50  低溫  負(fù)20
鹽酸溴己新(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定Bromhexine HCl  英文名稱MousepANCAELISAKit小鼠抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(甲固定)(pANCA)規(guī)格:96T/48T  大鼠胰脂肪酶(PL)ELISA試劑盒 ,英文名: PL ELISA Kit

雷西莫特質(zhì)量規(guī)格:>98%,TLR7/TLR8激動(dòng)劑R848,Resiquimod  胞漿微型RNA(miRNA)超濾法分離試劑盒10  人抗Q熱抗體(ai-Q-Ab)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanai-Qfeveraibody,ai-Q-AbELISAKit 96T/48T

羥甲煙胺(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定N-(Hydroxymethyl)nicotinamide  RabbitTissuefactorpathwayinhibitor,TFPIELISA試劑盒兔組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  大鼠γ氨基(GABA)試劑盒 Rat Gamma-aminobyric acid,GABA ELISA Kit

鹽酸布比卡因(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定Bupivacaine  Monohydrate  小鼠β酚(β-Nph)ELISA試劑盒 ,英文名: β-Nph ELISA Kit  CLIAKitfo4ELISAKit大鼠甲狀腺素規(guī)格:48T/96T
瘧原蟲PCR 熔解曲線法檢測(cè)試劑盒marc-145-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)猴胚胎腎上皮細(xì)胞 Marc-145-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) monkey embryonic kidney epithelial cells DMEM+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin1,4,5,8-萘四甲酰基二(>97.0%(N))1,4,5,8-Naphthalenetetracarboxdiimide質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(N)

PDGFC Protein Human 重組人 PDGF-C 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)3,4,9,10-苝四甲酰二亞胺(>95.0%(N))3,4,9,10-Perylenetetracarboxylic Diimide質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(N)

人氣管上皮細(xì)胞(HTEpiC)(5×105 ) MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元 Mouse9,10-(1-萘基)(>98.0%(HPLC))9,10-Di(1-naphthyl)anthracene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)

貓腎細(xì)胞;CRFK2,3,6,7,10,11-(己氧基)苯并菲(>98.0%(HPLC))2,3,6,7,10,11-Hexakis(hexyloxy)triphenylene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)

CALR Others Human CALR / Calreticulin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 二萘嵌苯(>98.0%(GC))Perylene質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1.
標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 765432
2.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3.
7 號(hào)管中加入 5 μL 陽(yáng)性對(duì)照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4.
換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7.
用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8.
如果有 N 個(gè)樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,多出的一個(gè)用作樣品制備陽(yáng)性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9.
如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1 個(gè)用于PCR 陽(yáng)性對(duì)照。

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