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其他類elisa定量檢測試劑盒操作流程

時間:2017/9/27閱讀:295
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其他類elisa定量檢測試劑盒操作流程:

1.根據需要,將若干孔德條帶放置在支架上;

2.將標本、陰性質控、陽性質控以及標準品作1:200稀釋(將5μl樣品加稀釋液稀釋到1ml,混勻);

3.取100μl已稀釋的血清樣品、標準品和陰性質控、陽性質控加入相應得孔板內(質控和標準品至少需做兩孔),A1孔不加液體作為空白底色;

4.在37℃溫箱中放置30分鐘;

5.到時間后將孔被液體甩去,并用1X洗滌液反復清洗4次,zui后用蒸餾水洗一次;

6.在每孔內加100μl酶結合物(需按比例稀釋,除A1孔外),輕微混勻;

7.在37℃溫箱中放置30分鐘;

8.甩去孔內酶結合物,用1X洗滌液反復清洗4次,zui后用蒸餾水洗一次;(包括A1孔也加),輕微

9.在每孔內加100μlTMB(使用前混合A液和B液)混勻;

10.37℃放置15分鐘;,輕微混勻;

11.每孔加50μl1N硫酸終止液(包括A1孔)

12.在15分鐘內,用酶標儀在450nm處讀取吸光度值(OD值)(將酶標儀A1孔設定為空白孔)。
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