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如何避免細(xì)胞抱團(tuán)?
1.用無鈣鎂*洗滌細(xì)胞。
2.對于貼壁非常牢固的細(xì)胞(如MDCK),為了細(xì)胞更好的狀態(tài),更漂亮的樣子,建議分多批多次消化,這樣才能da限度地將*對細(xì)胞的損傷降到低,保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠you。
3.細(xì)胞生長密度不要太高,70%-80%就好(細(xì)胞剛剛基本成單層細(xì)胞,沒有出現(xiàn)成層生長),這樣細(xì)胞抱團(tuán)的幾率就大大減少了。如果細(xì)胞已經(jīng)長成集落,可先將細(xì)胞低密度傳代,第二天再消化傳代,這樣連續(xù)傳三次,細(xì)胞抱團(tuán)的就越來越小,這樣幾代過后,再按照常規(guī)消化方法和時間能將細(xì)胞逐漸傳成單個的。
4.消化過程中hao不要使勁搖動培養(yǎng)瓶,這樣細(xì)胞特別容易成屑樣脫落。細(xì)胞一旦脫落入懸液里就很難再將他吹打成單個(因?yàn)榧?xì)胞沒有受力點(diǎn)了,所以細(xì)胞很難分散開)。所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開,嚴(yán)格控制好消化程度。
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