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*3(VD3)elisa定量檢測(cè)試劑盒的實(shí)驗(yàn)流程和試劑組成

時(shí)間:2018-12-28閱讀:164
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*3(VD3)elisa定量檢測(cè)試劑盒  實(shí)驗(yàn)流程: 

1. *3(VD3)ELISA檢測(cè)試劑盒從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

*3(VD3)elisa定量檢測(cè)試劑盒的試劑組成: 

(1)結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;
(2)洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;
(3)酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);
(4)酶的底物;
(5)陰性對(duì)照品和陽(yáng)性對(duì)照品(定性測(cè)定中),ELISA試劑盒參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測(cè)定中);
(6)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);

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