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為你出游盡我所能ELISA試盒劑

時(shí)間:2019-6-11閱讀:332
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總結(jié)和展望
本文以ELISA競(jìng)爭(zhēng)法方法學(xué)開(kāi)發(fā)和初步方法學(xué)驗(yàn)證的案例概論了功能學(xué)實(shí)驗(yàn)和定量實(shí)驗(yàn)的通用原則,包含以下幾個(gè)步驟:

1. 鑒于生物學(xué)方法的雙重間接性,明確檢測(cè)的目標(biāo)分子,設(shè)置多個(gè)陽(yáng)性對(duì)照組和陰性對(duì)照組,理清信號(hào)值和檢測(cè)目標(biāo)分子的線性聯(lián)系;

2. 建立Test system,通過(guò)配體受體的結(jié)合實(shí)驗(yàn),尋找合適的配體受體相對(duì)濃度以得到樣品對(duì)Test system的敏感性;

3. 加入梯度稀釋的樣品進(jìn)入Test system,繪制樣品相對(duì)于Test system的劑量全曲線;

4. 以實(shí)驗(yàn)?zāi)康臑閷?dǎo)向,分別對(duì)親和力大小比較為目的和大分子定量為目的進(jìn)行差異的濃度點(diǎn)選擇,并通過(guò)合規(guī)的方法學(xué)評(píng)價(jià)程序?qū)Ψ椒ǖ馁|(zhì)量進(jìn)行初步的評(píng)價(jià)。 

ELISA直接法和ELISA競(jìng)爭(zhēng)法有相同的方法學(xué)質(zhì)量評(píng)價(jià)程序和標(biāo)準(zhǔn),即親和力大小比較的方法學(xué)質(zhì)量評(píng)價(jià)程序和標(biāo)準(zhǔn)USP1032,1033,1034;定量分析的方法學(xué)質(zhì)量評(píng)價(jià)程序和標(biāo)準(zhǔn)2015版中國(guó)藥典第三部9012 生物樣品定量分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則或者美國(guó)FDAxin版本的Guidance for Industry Bioanalytical Method Validation。ELISA競(jìng)爭(zhēng)法在相同的實(shí)驗(yàn)條件下對(duì)于對(duì)照品濃度點(diǎn)的微調(diào)可以完成親和力大小比較和大分子定量?jī)煞矫鎽?yīng)用,這個(gè)有別于筆者之前的文章ELISA技術(shù)應(yīng)用概覽和方法學(xué)開(kāi)發(fā)初析對(duì)于ELISA直接法兩方面不同應(yīng)用不同的實(shí)驗(yàn)條件,但是兩類方法的四種應(yīng)用均能夠通過(guò)驗(yàn)證符合標(biāo)準(zhǔn)要求,只能說(shuō)實(shí)踐出真知,不管白貓黑貓,能抓住老鼠的就是好貓了。

在體外所有的體外功能學(xué)實(shí)驗(yàn)中,樣品引起檢測(cè)體系的變化,并以信號(hào)的形式展示出來(lái),這個(gè)應(yīng)該是體外生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法通用的原則,有結(jié)合才會(huì)有功能,功能是對(duì)藥物引起的變化(響應(yīng)標(biāo)志物)的準(zhǔn)確定量。理解ELISA實(shí)驗(yàn)關(guān)于結(jié)合和定量的應(yīng)用以及方法質(zhì)量評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)對(duì)于所有的功能學(xué)實(shí)驗(yàn)的開(kāi)發(fā)和評(píng)價(jià)都有著十分重要的借鑒意義,ELISA里面有乾坤。

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