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hDPSCs 人前磨牙牙髓干細(xì)胞保存

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所  在  地上海市

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更新時(shí)間:2017-08-07 13:27:04瀏覽次數(shù):174次

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產(chǎn)地 進(jìn)口 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
hDPSCs 人前磨牙牙髓干細(xì)胞保存,冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。

產(chǎn)品名稱(chēng):hDPSCs 人前磨牙牙髓干細(xì)胞保存
英文名稱(chēng):HDPSCs first molar dental pulp stem cells
規(guī)格:5×105cells/瓶
產(chǎn)品貨號(hào):FS-X0078
hDPSCs 人前磨牙牙髓干細(xì)胞保存的運(yùn)輸和保存
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶(hù)協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿(mǎn)干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿(mǎn)*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
收到后的處理:
1)收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查是否漏液,如果漏液,請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2)請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4)如果細(xì)胞長(zhǎng)滿(mǎn)(90%以上)請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
5)接到細(xì)胞次日,請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉?/a>。
hDPSCs 人前磨牙牙髓干細(xì)胞保存培養(yǎng)操作流程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備F-12K培養(yǎng)基(F-12K,GIBCO,貨號(hào)21127-022),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混 合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換 液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3ml此細(xì)胞的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.移入到事先準(zhǔn)備好的含有5ml培養(yǎng)基的T-25培養(yǎng)瓶中或含有14ml培養(yǎng)基的T-75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例;
      1,細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗一遍后加入1ml*,細(xì)胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
      2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
      3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

14144-06-0    分子式:    C33H52O8    576.76    20mg
原阿片堿    英文名稱(chēng):    Protopine    :    130-86-9    分子式:    C20H19NO5    353.37    20mg
*    英文名稱(chēng):    Etoposide    :    33419-42-0    分子式:    C29H32O13    588.56    20mg
鹽酸益母草堿    英文名稱(chēng):    Leonurine hydrochloride    :    24697-74-3    分子式:    C14H22ClN3O5    347.79458    20mg
乙酰紫堇靈    英文名稱(chēng):    Acetylcorynoline    :    18797-80-3    分子式:    C23H23NO6        20mg
紫堇靈    英文名稱(chēng):    (+)-corynoline    :    18797-79-0    分子式:    C21H21NO5    367.399    20mg
脫氫紫堇堿    英文名稱(chēng):    Dehydrocorydaline    :        分子式:    C22H24NO4    366.44    20mg
異鼠李素--3-O-β-D-葡萄糖苷    英文名稱(chēng):    Isorhamnetin-3-O-β-D-Glucoside    :    5041-82-7    分子式:    C22H22O12    478.4    20mg
鴨腳樹(shù)葉堿    英文名稱(chēng):    2α,5α-Epoxy-1,2-dihydroakuammilan-17-oic acid methyl ester    :    4684-32-6    分子式:    C20H22N2O3    338.405    20mg
銀鍛苷    英文名稱(chēng):    Tiliroside    :    20316-62-5    分子式:    C30H26O13    594.52    20mg
3-乙酰基乳香酸     英文名稱(chēng):    alpha-boswellic acid,3-acetyl    :        分子式:            20mg
3-乙酰基-11-酮基乳香酸    英文名稱(chēng):    beta-boswellic acid,3-acetyl,11-keto    :        分子式:            20mg
異甜菊醇     英文名稱(chēng):    Isosteviol    :    27975-19-5    分子式:    C20H30O3    318.45    10mg
鹽酸吐根酚堿    英文名稱(chēng):    Cephaeline hydrochloride    :    3738-70-3    分子式:    C28H40Cl2N2O4    539.53    20mg
一枝蒿甲素      英文名稱(chēng):    Bullatine A    :    1354-84-3    分子式:    C22H33NO2         20mg
異虎耳草素     英文名稱(chēng):    Isopimpinellin    :    482-27-9    分子式:            10mg
野漆樹(shù)苷    英文名稱(chēng):    Rhoifolin    :    17306-46-6    分子式:    C27H30O14    578.52    20mg
女貞苷    英文名稱(chēng):    ligustroflavone    :    260413-62-5    分子式:    C33H40O18    724.67    20mg
α-亞麻酸    英文名稱(chēng):    Linolenic acid    :    463-40-1    分子式:    C18H30O2    278.43    20mg
洋艾素(95%)    英文名稱(chēng):    Absinthin    :        分子式:    C20H20O8    388.37    20mg
異型南五味子丁素    英文名稱(chēng):    Heteroclitin D    :        分子式:            20mg
油酸    英文名稱(chēng):    cis-9-Octadecenoic acid    :    112-80-1    分子式:    C18H34O2    282.46    20mg
雅姆皂苷元     英文名稱(chēng):    Yamogenin    :    512-06-1    分子式:              10mg
 8-乙氧基滇烏堿(95%)    英文名稱(chēng):     8-O-ethylyunaconitine    :          分子式:     C35H51NO10          20mg
 硬飛燕草堿    英文名稱(chēng):    Delsoline    :      509-18-2    分子式:     C25H41NO7    467.599     20mg
蕓苔素內(nèi)酯    英文名稱(chēng):    Brassinolide    :    72962-43-7    分子式:    C28H48O6    480.68    20mg
一葉萩堿    英文名稱(chēng):    Securinine     :    5610-40-2     分子式:    C13H15NO2    217.26    20mg
一枝蒿庚素    英文名稱(chēng):    Bullatine G    :        分子式:    C22H31NO3         10mg
hDPSCs 人前磨牙牙髓干細(xì)胞保存茵芋堿    英文名稱(chēng):    Chloroxylonine    :    83-95-4    分子式:    C14H15NO4    261.27    20mg
異鼠李素-3-O-半乳糖苷    英文名稱(chēng):    Isorhamnetin-3-O-galactoside     :    6743-92-6    分子式:    C22H22O12    "478.41
"    10mg

 

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