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大鼠神經肽Y(NPY)檢測試劑盒檢測原理和檢測前準備工作

時間:2018/11/22閱讀:359
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大鼠神經肽Y(NPY)檢測試劑盒檢測原理:

本試劑盒采用雙抗體夾心法:抗大鼠神經肽Y(NPY)單抗包被于酶標板上,標本和標準品中的神經肽Y(NPY)會與單抗結合,游離的成份被洗去。加入酶標抗體,抗大鼠神經肽Y(NPY)抗體與結合在單抗上的大鼠神經肽Y(NPY)結合而形成免疫復合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物,若反應孔中有神經肽Y(NPY),辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑現藍色,加終止液變黃。在450nm處測OD值,神經肽Y(NPY)濃度與OD450值之間呈正比,可通過繪制標準曲線求出標本中的神經肽Y(NPY)濃度。

選用世界的原料,采用專業體外診斷試劑技術。適用于體外定量檢測大鼠血清、血漿或細胞培養上清液中天然重組大鼠神經肽Y(NPY)濃度。僅供科研使用,使用前請仔細閱讀說明書并檢查試劑組分。

大鼠神經肽Y(NPY)檢測試劑盒檢測前準備工作:

1. 請提前20分鐘從冰箱中取出試劑盒,平衡至室溫。

2. 將濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋(1:25)。未用完的放回4℃。從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結晶,屬于正常現象,可用40℃水浴微加熱使結晶*溶解后再配制洗滌液(加熱溫度不要超過50℃,使用時洗滌液應為室溫)。當日使用。

3. 標準品: 于10000×g離心1分鐘,加入標準品&樣品稀釋液1.0mL至凍干標準品中,旋緊管蓋,靜置10分鐘,上下顛倒數次,待其充分溶解后,用移液器將其輕輕混勻(濃度為2000pg/mL。)。然后根據需要進行倍比稀釋(注:不要直接在反應孔中進行倍比稀釋)。建議配制成以下濃度:按照稀釋方法圖例 標準品&樣品稀釋液直接作為空白孔0ng/mL。如配制5ng/mL標準品:取0.5mL10ng/mL的上述標準品加入含有0.5mL標準品&樣品稀釋液的EP管中,混勻即可,其余濃度依此類推。  

4. 生物素化抗體工作液:實驗前計算當次實驗所需用量(以100μL/孔計),實際配制時應多配制100-200μL。使用前15分鐘,以生物素化抗體稀釋液稀釋濃縮生物素化抗體(1:100)成工作濃度。當日使用。

5. 酶結合物工作液:實驗前計算當次實驗所需用量(以100μL/孔計),實際配制時應多配制100-200μL。使用前15分鐘,以酶結合物稀釋液稀釋濃縮HRP酶結合物(1:100)成工作濃度。

當日使用。

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